尼氏染色

      尼氏染色（Nissl Staining）是用堿性染料染神經組織的一種方法。尼氏體是胞質內的一種嗜堿性物質，廣泛見于各種神經元，不同神經元中的尼氏體形狀、大小和數量則各有差異。用于尼氏染色的堿性染料主要有焦油紫、亞甲藍、甲苯胺藍和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏體，用來觀察神經元內的細胞結構；還可以通過尼氏染色后對尼氏體的觀察來了解神經元的損傷情況。

尼氏染色原理：神經元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒，即能夠代表粗面內質網并在很多神經元中產生特異的斑點狀嗜堿性表現的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質，也可以顯示神經元的細胞核和神經膠質。各種神經細胞內都含有尼氏體，但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中，但不在于軸突和包體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態的變化而變化，尼氏體是神經元內合成蛋白質合成的重要部位，當神經元受到刺激后，包體內的尼氏體會明顯減少。通常尼氏能被堿性染料如硫堇、亞甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。常用的堿性染料有Cresyl violet (焦油紫，甲酚紫，克紫）；thionine (硫荲)；tolridine blue (甲苯胺藍)等

尼氏染色步驟：

1.常規脫蠟至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脫水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）

2.蒸餾水沖洗3次，每次5min

3.然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4.蒸餾水洗凈染料后，于分別置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脫水，再用二甲苯透明

5.后用中性樹膠封片。

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